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技術文章

TECHNICAL ARTICLES

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  • 20206-4
    大腸桿菌的蛋白表達試驗要注意哪些?

    蛋白表達技術已滲透到生命科學研究的各個領域。越來越多的基因被發現,其中多數基因功能不明,利用蛋白表達系統表達目的基因是研究基因功能及其相互作用的重要手段。常見的蛋白表達系統包括大腸桿菌/原核蛋白表達系統、酵母/真核蛋白表達系統、哺乳動物細胞蛋白表達系統、昆蟲細胞蛋白表達系統、植物蛋白表達系統。我們如何得到可溶的蛋白?如果希望得到能行使功能的蛋白,蛋白應該以可溶形式表達。避免包涵體形成的方法很多,比如選用表達量不高的蛋白表達系統,選擇有助于可溶性表達的融合蛋白表達系統等,使用基...

  • 20205-29
    微生物內進行蛋白質表達前需要考慮的8件事

    在微生物內進行蛋白質表達是生物科技中的核心技術。然而,每種蛋白質都具有其*的結構性質,比如二硫鍵(disulfidebonds)數量,是否存在疏水區域(hydrophobicregions),是否存在跨膜區域(transmembranedomains),是否具有糖基化(glycosylations)等翻譯后修飾過程等,所有的這些性質都可能決定著蛋白質表達過程的難易。在與目的蛋白質來源相似的宿主內表達蛋白質要相對容易些。然而,大多時候,我們需要在與蛋白質來源不同的宿主內進行蛋白...

  • 20205-28
    多肽合成技術原理,多肽合成方法解讀

    多肽是蛋白質水解的中間產物,是α-氨基酸以肽鍵連接在一起而形成的化合物。由兩個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做二肽,同理有n個氨基酸分子脫水縮合而成的化合物叫做n肽。通常把三肽以上的叫多肽。多肽合成以固相合成為反應原理,在密閉的防爆玻璃反應器中使氨基酸按照已知順序(序列,一般從C端-羧基端向N端-氨基端)不斷添加、反應、合成,操作終得到多肽載體。固相合成法,大大的減輕了每步產品提純的難度。為了防止副反應的發生,參加反應的氨基酸的側鏈都是保護的。羧基端是游離的,并且在反應之前...

  • 20205-24
    抗體制備有關佐劑的配制講解

    有了質量好的抗原,還必須選擇適當的免疫途徑,才能對抗體制備質量好(特異性強和效價高)的抗體。今天我們來看看佐劑的配制:由于不同個體對同一抗原的反應性不同,而且不同抗原產生免疫反應的能力也有強有弱,因此常常在注射抗原的同時,加入能增強抗原的抗原性物質,以刺激機體產生較強的免疫反應,這種物質稱為免疫佐劑。佐劑除了延長抗原在體內的存留時間,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激網狀內皮系統,使參與免疫反應的免疫活性細胞增多,促進T細胞與B細胞的相互作用,從而增強機體對抗原的細胞免...

  • 20205-21
    單克隆抗體的純化技術操作步驟

    本文由艾柏森生物提供從培養液或腹腔積液獲得的單克隆抗體,不需要純化即可應用于日常診斷或定性研究。如果用于免疫標記測定,須分離和純化。可用半飽和、飽和硫酸銨進行沉淀,進行初步濃縮和純化;可用親和層析法進一步純化。一、腹水型單抗的純化在單抗純化之前,一般均需對腹水進行預處理,目的是為了進一步除去細胞及其殘渣、小顆粒物質、以及脂肪滴等。常用的方法有二氧化硅吸附法和過濾離心法,以前者處理效果為佳,而且操作簡便。1、二氧化硅吸附法新鮮采集的腹水(或凍存的腹水),2000r/min15分...

  • 20205-20
    常見的融合蛋白表達標簽——總結

    在重組蛋白中,常常將目的蛋白N端或C端與其他特定蛋白、多肽或寡肽標簽進行融合表達,形成既能保留天然蛋白的大部分結構,又能實現增溶,防降解,促進分泌,便于純化的功能;本文簡要介紹生物藥研發生產過程中常見的融合蛋白標簽;一、純化標簽His標簽His標簽是當前流行的標簽蛋白。His標簽是指六個組氨酸殘基組成的融合標簽,可插入在目的蛋白的C末端或N末端。當某一個標簽的使用,一是能構成表位利于檢測;二是構成*的結構特征(結合配體)利于純化。其特點可總結為以下幾點:1.標簽的分子量小,只...

  • 20205-14
    技術服務 抗體測序服務

    艾柏森生物科技有限公司作為值得信賴的抗體研發服務供應商,擁有專業的技術團隊,可為客戶提供的抗體測序服務。艾柏森生物打造的全新一代抗體測序平臺,基于蔦槍法與抗體數據庫相結合的技術“DatabaseAssistedShotgunSequencing”(DASS)技術,這項技術還適用于其他亞型和不同形式的抗體,如:IGM,熒光偶聯抗體,固定化抗體,不同物種的抗體等。等重氨基酸測序與其它基于MS測序方法不同的是,我們可以分辨大多數等重氨基酸復合物★W可與GE、AD、SV區分★R可從G...

  • 20205-14
    技術服務 X-射線晶體學

    技術介紹:X-射線分辨單克隆抗體-抗原復合物是分析單克隆抗體識別表位的可靠方法,該方法基于對單克隆抗體-抗原共晶體衍射的X-射線束的強度和角度測量,再用生物信息學的方法確定原子坐標,將復合體的三維結構完整可視化。抗原表位分析對抗體人源化改造,抗體親和力提高,抗體穩定性改造,發現新的功能表位,改變抗體特異性,設計新抗體,基于抗原-抗體相互作用的立體構型設計新型功能分子改造抗體都很重要。應用該方法首先需獲得純度較高的抗原、抗體,并使其相互作用形成共晶,但由于成本及技術要求較高,難...

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