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Western Blot實(shí)驗(yàn)

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蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)通過(guò)特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過(guò)的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色,通過(guò)分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的分子生物學(xué)技術(shù)。

產(chǎn)品型號(hào):
更新時(shí)間:2020-05-14
廠商性質(zhì):代理商
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蛋白質(zhì)印跡法(Western Blot)通過(guò)特異性抗體對(duì)凝膠電泳處理過(guò)的細(xì)胞或生物組織樣品進(jìn)行著色,通過(guò)分析著色的位置和著色深度獲得特定蛋白質(zhì)在所分析的細(xì)胞或組織中表達(dá)情況的分子生物學(xué)技術(shù)。

 

 

采用聚丙烯酰胺凝膠電泳進(jìn)行蛋白質(zhì)樣品的分離,隨后將蛋白轉(zhuǎn)移到硝酸纖維素薄膜上進(jìn)行固定。固定的目的蛋白即為抗原,因此加入適量的對(duì)應(yīng)抗體進(jìn)行免疫反應(yīng),能與抗體緊密結(jié)合的抗原及為目的蛋白。而后加入有標(biāo)記的二抗或酶,因此結(jié)合的抗原-抗體可被檢測(cè)到。 

WB

大致流程如下:

1.        蛋白質(zhì)的樣品制備

2.        蛋白質(zhì)定量

3.        蛋白質(zhì)樣品SDS-PAGE電泳

4.        轉(zhuǎn)PVDF膜或硝化纖維膜

5.        免疫雜交反應(yīng)

6.        化學(xué)發(fā)光(ECL),顯影,定影

7.        凝膠圖象分析

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