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抗體制備之抗血清篇

更新時間:2021-07-26點擊次數:1037
     抗體制備之抗血清篇。
  抗血清的制備
  有了質量好的抗原,還必須選擇適當的免疫途徑,才能產生質量好(特異性強和效價高)的抗體。
  (一)用于免疫的動物
  作免疫用的動物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據抗原的 生物 學特性和所要獲得抗血清數量,如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因動物反應良好,而且能夠提供足夠數量的血清,用于免疫的動物應適齡,健壯,無感染性疾患,最好為///雄性,此外還需十分注意動物的飼養,以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔,最好用純種新西蘭兔,一組三只,兔的體重以2~3kg為宜。
  (二)免疫途徑
  免疫途徑有多種多樣,如靜脈內、腹腔內、肌肉內、皮內、皮下、淋巴結內注射等,一般常用皮下或背部多點皮內注射,每點注射0.1ml左右。途徑的選擇決定于抗原的 生物 學特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物學活性抗原,一般不宜采用靜脈注射。
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  由于不同個體對同一抗原的反應性不同,而且不同抗原產生免疫反應的能力也有強有弱,因此常常在注射抗原的同時,加入能增強抗原的抗原性物質,以刺激機體產生較強的免疫反應,這種物質稱為免疫佐劑。
  佐劑除了延長抗原在體內的存留時間,增加抗原刺激作用外,更主要的是,它能刺激網狀內皮系統,使參與免疫反應的免疫活性細胞增多,促進T細胞與B細胞的相互作用,從而增強機體對抗原的細胞免疫和抗體的產生。
  常用的佐劑是福氏佐劑(Freund adjuvant),其成分通常是羊毛脂1份、石臘油5份,羊毛脂與石臘油的比例,視需要可調整為1:2~9(V/V),這是不*福氏佐劑,在每毫升不*佐劑加入1~20mg卡介苗就成為*佐劑。
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